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本片最初是南京军区前线话剧团于1962年创作演出的话剧，故事蓝本取材于驻守上海南京路上的好八连。该剧公演后获得极大反响，全国各地剧团争相排演。1963年，前线话剧团进京演出期间，周恩来总理指示一定要把该剧搬上银幕，并且特别关照电影要用前线话剧团的原班人马，一句台词不能改，一个演员不能换。为了方便拍摄，文化部决定由好八连所在地的上海天马电影制片厂摄制，而周总理又点名要八一厂的王苹执导，因为她既熟悉部队生活，也熟悉上海 。

电影开拍前，周总理请前线话剧团《霓虹灯下的哨兵》剧组主创人员吃饭，强调政府很重视这部电影的拍摄，国产胶片不稳定，所以给他们用的是伊斯曼胶片，一艘远洋货轮的农产品只能换回一小舱这样的胶片，鼓励大家好好拍。

影片是在南京路实景拍摄的，为了便于剧组取景拍摄，上海市史无前例地封锁了南京路。